鼠抗蓖麻毒素單克隆抗體并鑒定其特性.方法以甲醛處理的蓖麻毒素毒蛋白為抗原免疫BALB/c小鼠；取免疫小鼠的脾細(xì)胞與Sp2/0骨髓瘤細(xì)胞融合，經(jīng)間接ELISA法篩選、融合細(xì)胞有限稀釋法克隆、克隆化雜交瘤細(xì)胞株的亞類(lèi)鑒定等方法篩選出單克隆抗體雜交瘤細(xì)胞株，用雜交瘤細(xì)胞株誘生小鼠腹水，應(yīng)用蛋白A親和層析法進(jìn)行單抗的純化，并對(duì)鼠抗蓖麻毒素單克隆抗體的特異性進(jìn)行鑒定。

　　根據(jù)蓖麻毒素的作用機(jī)制，可以從抗體及小分子拮抗劑方面阻斷蓖麻毒素發(fā)揮其毒性作用。文獻(xiàn)報(bào)道抗蓖麻毒素B鏈的抗體可以通過(guò)阻斷蓖麻毒素與細(xì)胞表面半乳糖受體的結(jié)合，從而阻斷蓖麻毒素進(jìn)入細(xì)胞，抗蓖麻毒素A鏈的抗體能夠通過(guò)與N_糖苷酶的活性位點(diǎn)特異結(jié)合，阻斷蓖麻毒素A鏈的RNA酶的活性，防止其酶解RNA，進(jìn)而阻止其發(fā)揮細(xì)胞毒性作用，故此可以作為良好的Ricin中毒后的解毒劑。到目前為止，文獻(xiàn)中提到的具有中和活性的Ricin抗體所識(shí)別的表位均處于A鏈或B鏈上相應(yīng)的活性位點(diǎn)中。本文的抗蓖麻毒素A鏈單克隆抗體所識(shí)別的表位均處于A鏈的活性位點(diǎn)以外，但在體內(nèi)外均有針對(duì)蓖麻毒素的中和保護(hù)作用。

　　為了建立免疫層析技術(shù)定量檢測(cè)蓖麻毒素試劑，首先依據(jù)蓖麻毒素對(duì)半乳糖的特異性結(jié)合能力，采用親和層析技術(shù)對(duì)蓖麻種子進(jìn)行親和層析純化；其次采用凝膠過(guò)濾層析技術(shù)，獲得更純的天然蓖麻毒素純品；后以天然的蓖麻毒素脫毒為免疫原，分別免疫獲得鼠抗相思中毒素單克隆抗體和兔抗蓖麻毒素多克隆抗體，利用獲得的鼠抗蓖麻毒素單克隆抗體作為標(biāo)記抗體。